一、双缩脲(Biuret)
双缩脲是一种有机化合物,由两分子尿素(NH₂CONH₂)在高温(约150-160℃)下缩合而成,同时释放一分子氨(NH₃)。其分子式为 H₂N-CO-NH-CO-NH₂(或写作NH₂(CONH)₂NH),结构中包含两个相邻的酰胺键(-CO-NH-)。
双缩脲本身为白色结晶粉末,微溶于水,易溶于乙醇。它在化学分析中并非关键物质,但其命名的由来与一种重要的显色反应相关——双缩脲反应(Biuret Reaction)。
二、双缩脲反应
双缩脲反应是指:含有两个或两个以上肽键(-CO-NH-)的化合物(如蛋白质、多肽、双缩脲等),在碱性条件下与铜离子(Cu²⁺)结合,生成紫色或紫红色络合物的反应。
双缩脲本身因含两个酰胺键(可视为简化的肽键),也能与Cu²⁺发生此反应,故该反应以“双缩脲”命名。
三、双缩脲试剂(Biuret Reagent)
双缩脲试剂是基于双缩脲反应设计的生物化学试剂,用于检测样品中是否存在蛋白质或多肽(本质是检测肽键)。
1. 成分
- A液:质量浓度约0.1g/mL的氢氧化钠(NaOH)溶液(提供碱性环境)。
- B液:质量浓度约0.01g/mL的硫酸铜(CuSO₄)溶液(提供Cu²⁺)。
2. 使用方法
需先加A液(NaOH),摇匀后再滴加少量B液(CuSO₄),避免Cu²⁺直接与OH⁻生成Cu(OH)₂沉淀(蓝色沉淀会干扰观察)。最终在碱性环境中,Cu²⁺与肽键形成紫色络合物。
3. 现象与意义
- 若样品含蛋白质或多肽(含≥2个肽键),溶液由蓝色(CuSO₄的颜色)变为紫色(或紫红色)。
- 若样品仅含氨基酸(无肽键),则无颜色变化(仍为蓝色)。
四、关键区别总结

五、应用
- 双缩脲反应:用于定性或半定量检测蛋白质、多肽(如实验室鉴定蛋白质)。
- 双缩脲试剂:生物学实验中常用(如检测组织样液中的蛋白质),也可用于食品工业中蛋白质含量的粗略测定。
总结:双缩脲是一种含两个酰胺键的化合物,其命名的“双缩脲反应”是检测蛋白质的基础;双缩脲试剂则是利用该反应设计的工具,通过颜色变化指示蛋白质的存在。
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